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粪链球菌微生物检测板
产品时间:2019-01-24
粪链球菌微生物检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有标准的营养培养基,冷水可溶性的吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在检测板上呈红色带黄晕斑点。

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一、粪链球菌微生物检测板产品介绍
1、原理及适用范围
粪链球菌普遍存在于水环境中,为条件致病菌,它来源于人和温血动物的粪便,可以在水中存活很长时间,引起人类疾病。是水体受到粪便污染的重要指标菌,更能客观的反映水质卫生状况。中华人民共和国城镇建设标准在对城市供水、饮用水水质监测中增加了水中粪链球菌的检测指标。粪链球菌检测板是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有标准的营养培养基,冷水可溶性的吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在检测板上呈红色带黄晕斑点。本产品适合于生活饮用水、生产加工用水及食品中粪链球菌的测定。 
执行标准:中华人民共和国国家标准《饮用天然矿泉水检验方法》(GB/T 8538);中华人民共和国进出口商品检验行业标准《出口商品中粪链球菌群检验》(SN/T 0475)。 
2、操作方法
2.1水样品检测
2.1.1 水样过滤:将灭菌的过滤装置连接到抽滤瓶上,用灭菌镊子夹取直径47 mm~50 mm,孔径为0.45μm的灭菌滤膜,放在滤器底部,旋紧盖子,将250 mL水样注入滤器中抽滤。
2.1.2  揭开检测板上层膜,在检测板纸片上加1 mL无菌水湿润后,迅速用无菌镊子将过滤水样的滤膜移放在检测板纸片上(滤膜截留细菌面向上),滤膜与纸片之间不要夹留着气泡,贴好上层膜。
2.2食品样品检测
2.2.1  取25 g(或25 mL)样品放入装有225 mL生理盐水的均质袋中,以8000 r/min均质1~2 min,制成1:10样品均液,根据样品污染程度及检验需要,可进一步制成10倍递增的样品稀释液。
2.2.2 将粪链球菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开,用无菌吸管吸取1 mL样品稀释液均匀滴加到纸片上,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,静置10 s左右,待样品稀释液被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复。
2.3 培养:将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内,36℃±1℃,培养15~24 h。
3、粪链球菌微生物检测板结果判读
在检测板(滤膜)上生长的红色带黄晕的斑点即为粪链球菌阳性,若纸片上的红色斑点无黄晕则为粪链球菌阴性。

4、计数原则及报告方式
4.1  滤膜过滤水样:以滤过一张无菌滤膜后产生的菌落数计算,选择菌落数在20~100CFU的检测板进行计数后即为250 mL水样品中所含的菌落总数。结果以CFU/250 mL为单位报告。
4.2 食品样品计数
4.2.1 以生长有30~300CFU的检测板为计数适宜范围。
4.2.2 若只有一个稀释度检测板上的菌落数在计数合适范围30~300CFU之间,则计算两个检测板菌落数的平均值,再除以相应的稀释倍数,作为每克(毫升)中菌落总数结果。
4.2.3 若有两个连续稀释度在适宜计数范围内时,按式(1)计算:
∑C
N= ————————     •••••••••••••••••••(1)
(n1+0.1n2)d
式中:
N——样品中粪链球菌菌落数;
∑C——两个连续稀释度检测板(含适宜范围菌落数的检测板)粪链球菌菌落之和;
n1——适宜范围菌落数的*个稀释度(低)检测板个数
n2——适宜范围菌落数的第二个稀释度(高)检测板个数
d——*稀释度的稀释倍数
示例:

稀释度

1:10(*个稀释度)

1:100(第二个稀释度)

菌落数

245,247

31,30


(245+247+31+30)
N= —————————— =2514
(2+0.1×2)×10-1
结果表述为2.5×103CFU/g(ml)。
4.2.4 若所有稀释度检测板上均无菌落生长,则以小于1/d(d—*低稀释倍数)计算。
4.2.5低数值的估算:如果实验样品原液(水及液体饮料)或初始稀释悬液(其他样品)的两个检测板上的菌落数均小于30CFU,计算两个检测板上的菌落数的平均数。计算式(2):
∑C
NE = ——    •••••••••••••••••••(2)
nd
式中:
NE——每毫升或每克样品中菌数的估算值;
∑C——两个检测板上菌落数的和;
n——检测板的数量;
d——样品初始悬液或实际接种悬液的稀释倍数。
4.2.6大数值的估算:若所有稀释度的检测板上菌落数均大于300CFU,计数*接近300CFU的检测板上的菌落并计算出平均数,其他检测板可记录为多不可计。结果计算式(3):
∑C
NE = ——   •••••••••••••••••••(3)
nd
式中:
NE——每毫升或每克样品中菌数的估算值;
∑C——两个检测板上菌落数之和;
n——检测板的数量;
d——与样品悬液相*的稀释倍数。
5、结果报告
固体样品以CFU/g为单位报告,液体样品以CFU/mL为单位报告。
6、附加说明
注意使用过的检测板上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理。

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